聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction,PCR）是现代分子生物学实验工作的基础之一

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1.miRNA提取。2.利用加尾法将RNA逆转录成cDNA。3.随机选择一个样品进行预实验,筛选引物,优化程序。4.荧光定量PCR正式试验。5.提交报告,原始Ct值。

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EvaGreen Dye: EvaGreen 是 Biotium 公司的DNA 结合染料，它是一种同时适用于实时 PCR 和 高分辨率熔解曲线（ HRM ）分析的新一代染料。

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