脯氨酸(PRO)含量检测试剂盒 可见分光光度法
 
品牌：Solarbio | 货号：BC0290
     
英文名称 : Proline (PRO) Content Assay Kit
     
别名 : 脯氨酸含量测定试剂盒 PRO Kit 脯氨酸（PRO）含量测定试剂盒 脯氨酸（PRO）含量测试盒
     
检测方法 : 可见分光光度法
 
 
 
   
 
     
         
             
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BC0290-50管/48样
             
Solarbio
             
50管/48样
             
720.00元
             
 
         
     
 

 产品组成：
 提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
 试剂一：冰乙酸 4℃保存。（自备）
 试剂二：液体 45 mL×1 瓶， 4℃保存。
 试剂三：甲苯 4℃保存。（自备）
 标准品：脯氨酸 10mg，4℃保存。
 
 产品说明：
 脯氨酸(Pro)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，逆境条件下，植物体内 Pro 含量显著增加。Pro 增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此，脯氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。
 用磺基水杨酸（SA）提取 Pro，加热处理后，Pro 与酸性茚三酮溶液反应生成红色；加甲苯萃取后，在 520nm 测定吸光度。
 
 需自备的仪器和用品：
 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、冰乙酸、甲苯、研钵、冰和蒸馏水。
 
 样品测定的准备：
 1、细胞、细菌或组织样品的制备 ：
 细菌或细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，弃上清；按照每 100 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率 20％，超声 3 秒，间隔 10 秒，重复 30 次），之后置沸水浴振荡提取10min；10000g，常温离心 10min，取上清，冷却后待测。
 组织：称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆；之后置沸水浴振荡提取 10min，10000g，常温离心 10min，取上清，冷却后待测。
 2、血清（浆）样品：取 100μL 血清（浆）加入 1mL 提取液，充分混匀，之后置沸水浴振荡提取 10分钟，10000g，常温离心 10 分钟，取上清，冷却后待测。
 3、标准品的处理:称取 1mg，将标准品稀释为 15、10、8、6、4、2、1、0 g/ml。
 
 测定步骤：
 1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 520nm，蒸馏水调零。
 2、取 0.5mL 上清液（或稀释后的标准品）+0.5mL 试剂一+0.5mL 试剂二于有盖试管中，置沸水浴中保温 30min（盖紧，防止水分散失），每 10min 振荡一次。
 3、待冷却后，在试管中加入 1mL 试剂三，振荡 30s，静置片刻，使色素转至试剂三中；吸取 0.8mL-1mL上层溶液于 1mL 玻璃比色皿中，用试剂三调零，于 520nm 波长处比色，记录吸光值。
 4、根据标准品吸光值和浓度，建立标准曲线。
 
 Pro 含量计算：
 1、通过标准曲线计算样品脯氨酸含量(y 为脯氨酸含量，μg/mL；x 为 OD 值)
 2、按照细菌、细胞个数或者组织鲜重计算，首先根据标准曲线求得 y 值：细胞或细菌中脯氨酸含量(μg/104 cell)= y÷细胞浓度(104 cell/mL)Pro 含量(μg/g mass) =y÷样本鲜重(g/mL)
 3、血清（浆）中脯氨酸含量，首先根据标准曲线求得 y 值：Pro 含量[μg/mL 血清（浆）] = y÷0.1mL 血清（浆）/mL
 
 注意：提取液中含有蛋白沉淀剂，提取的上清液不能用于蛋白浓度的测定。
 
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